1、血清學方法：

補體結(jié)合試驗：是診斷肺炎支原體感染廣泛使用的血清學診斷方法，取急性期和恢復期雙份血清效價呈4倍增長者，或單份血清效價≥1∶32者判為陽。其敏感性可達90%，特異性為94%，僅初次感染時出現(xiàn)陽性，再次感染時常不出現(xiàn)陽性反應。

（1）冷凝集試驗：是一種診斷肺炎支原體感染的非特異性試驗，有33%～76%感染者為陽性（效價≥1∶32）。效價越高該病的可能性越大，常在發(fā)病的第一周末或第二周初出現(xiàn)陽性反應，持續(xù)約2～4個月。此試驗在嬰幼兒腺病毒、副流感病毒等引起的肺炎和呼吸道感染也可出現(xiàn)假陽性反應。

（2）間接血凝試驗：主要檢測IgM抗體。此后7天出現(xiàn)陽性。10～30天達高峰，12～26周逐漸降低。急性期采血宜早，否則不易測出4倍增高的抗體。特異性尚不理想，與補結(jié)試驗相似。

（3）酶聯(lián)免疫吸附試驗：用于檢測IgM和IgG抗體。方法敏感、特異性高、快速、經(jīng)濟，是診斷肺炎支原體感染實用可靠的手段?，F(xiàn)已有ELISA試劑盒出售。

2、血象：

白細胞總數(shù)常在正常范圍內(nèi)，但偶爾亦可升高。25%患者白細胞超過10.0×109/L，少數(shù)可達（25.0～56.0）×109/L。分類以中性粒細胞或嗜酸粒細胞稍增多。血小板減少。直接庫姆斯（coombs）試驗可陽性。血沉在發(fā)病初期階段可增快。

3、核酸雜交試驗：

用放射性同位素（32P、125I等）標記的核酸探針技術進行肺炎支原體檢測。此法雖靈敏度高且特異性較強，但要求條件也較高，需要使用同位素，故難于在臨床推廣。

4、培養(yǎng)法：

因肺炎支原體營養(yǎng)要求高，生長緩慢，需觀察10～30天或更長時間，對臨床診斷幫助不大。目前國外仍使用美國疾病控制中心（CDC）推薦的Hayflied培養(yǎng)基，國內(nèi)多用首都兒科研究所以馬丁培養(yǎng)基或豬肺消化液為基礎的培養(yǎng)基。

5、聚合酶鏈反應（PCR）：

從綜合結(jié)果看，PCR法檢測的陽性率明顯高于培養(yǎng)法（靈敏度比普通培養(yǎng)法高10～100倍），也明顯高于血清學和探針雜交法。其特異性也較強，與其他支原體無交叉反應，且不受口腔其他菌污染的干擾。所需時間較短，因而采用PCR法可爭取早日確診，以指導臨床合理用藥。在中樞神經(jīng)系統(tǒng)出現(xiàn)癥狀時，快速可靠的診斷更為必要。由于此法相當敏感，故實驗操作時應特別小心，避免污染。