自病毒分離成功以來，對本病的特異性診斷技術(shù)迅速建立，檢測對象已由血清抗體發(fā)展到尿液抗體，由檢測抗體發(fā)展到細(xì)胞內(nèi)抗原和尿中可溶性抗原，檢測方法也日新月異。一般依據(jù)臨床特點和實驗室檢查、結(jié)合流行病學(xué)資料，在排除其他疾病的基礎(chǔ)上，進(jìn)行綜合性診斷，對典型病例診斷并不困難，但在非疫區(qū)，非流行季節(jié)，以及對不典型病例確診較難，必須經(jīng)特異性血清學(xué)診斷方法確診。

1、免疫熒光技術(shù)（IFAT）為常規(guī)方法之一。用間接免疫熒光法檢測患者血清特異性IgM和IgG抗體，前者在第1病日即可檢出，第2病日陽性率88.2%，第3病日達(dá)100%；IgG在2病日即可檢出，4～5病日陽性率達(dá)75%。直接免疫熒光法，可檢出白細(xì)胞及尿沉渣細(xì)胞內(nèi)病毒抗原，用于早期診斷。

2、酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA） 用雙抗體夾心法檢測可溶性抗原，用竟?fàn)幏z測阻斷抗體，特異、敏感，又可避免需要熒光顯微鏡。EHF-IgM捕獲法ELISA（Mac-ELISA）以不同病日血清IgM檢出率為97.7%，而IFAT法檢出率為88.7%，是一敏感、特異的診斷方法。

3、免疫粘附血凝法（IAHA）用于檢測抗體，其抗體滴度與免疫熒光抗體滴度相仿，又可區(qū)別不同類型病毒抗體。

4、反向被動血凝法（RPHA）用于檢測體液病毒抗原，與ELISA法滴度基本一致。

5、放射免疫法（RIA）國外用固相放射免疫法與ELISA進(jìn)行診斷及血清流行病學(xué)調(diào)查，其敏感性較免疫熒光法高10倍以上。

6、空斑減少中和試驗（PRNT）中和抗體是EHFV感染后產(chǎn)生的一種重要抗體，是目前用于病毒血清學(xué)分型的主要依據(jù)。本法要求嚴(yán)格，操作復(fù)雜費時，難以在一般試驗室開展。中和效價的高低與病型輕重有關(guān)，即重癥患者低，中型患者較高。

7、放射免疫沉淀試驗（RIP）有報告用RIP對83份不同病日患者血清測定，抗EHFV-NP（核蛋白）抗體最早出現(xiàn)，大多在4病日便可測出，其后為抗G2（糖蛋白），抗G1僅在少數(shù)標(biāo)本中方能測出。三種病毒結(jié)構(gòu)蛋白抗體滴度也是抗NP最高，抗G1最低。

8、應(yīng)用cDNA探針檢測EHFV-RNA的研究，最近國內(nèi)外先后獲得了病毒的M、S片段的多個cDNA克隆，可用于制備檢測EHFV核酸的探針。檢測EHF患者血液、尿液和外周血淋巴細(xì)胞中的EHFV核酸，具有較好的特異性和較高的敏感性，為發(fā)病機理和診斷研究提供了先進(jìn)手段。